金相显微镜的类型很多,参数也各不相同,可是不同的显微镜怎么知道自己需要的是哪款呢?除了看所需的参数外,还需要知道自己所观察的物品需要检测什么,要得出什么效果,今天的文章将为大家介绍金相显微镜的常用观察方法及各自的优缺点。
针对金相样品的物理特性,金相显微镜一般有明场、暗场、偏光、微分干涉这四种常见的观察方法,近十年最新的又出现了激光共聚焦的方法。
按照现代仪器“模块化设计,积木式结构”的设计思想,这四种功能并不一定固化在每一台金相显微镜上,而是以明场作为基本核心,可以将其他功能象“搭积木”一样组合到该显微镜上。
照明是金相研究中主要的观察方法。入射光线垂直地或近似垂直地照射在试样表面,利用试样表面反射光线进入物镜成像。如果试样是一个镜面,在视场内是明亮的一片,试样上的组织将呈色影像衬映在明亮的视场内,叫做“明场”照明。
明场观察优点:视野亮度高,均匀;应用范围广;操作简单,价格低。
明场观察缺点:低反差标本对比度低;标本没有立体感。
通过物镜的外周照明试样,照明光线不入射到物镜内,就可以得到试样表面漫反射光而形成的像。如果试样是一个镜面,由试样上反射的光线仍以极大的倾斜角向反方向反射,不可能进入物镜,在视场内是漆黑一片,只有试样凹凸之处才能有光线反射进入物镜,试样上的组织将以亮白影像映衬在漆黑的视场内,如同星星在夜空,叫做“暗场”照明。
暗场观察优点:观察到极其微小物体,分辨率可达0.02-0.004um(明场0.4um)。
暗场观察缺点:只能观察到物体存在、运动和外部形态。
利用偏光原理,对某些物质所具有的偏光性进行观察。
1
自然光与偏振光
自然光(或天然光)是指太阳光、电灯光,它的光振动是各个方向均衡的,都垂直于传播方向,若光振动局限在垂直于传播方向的平面内的某一个方向上,则称为偏振光。
2
偏振光的获得
常用方法有两种:偏振棱镜或人造偏振片
偏振棱镜
偏振棱镜是利用晶体的双折射现象而制成的偏振器件,无论是自然光还是偏振光通过偏振棱镜后就变成振动方向由棱镜偏振方向所决定的线偏振光。
偏振棱镜的种类很多,常见的偏振棱镜有尼科耳(Nicol)棱镜、格兰(Glan)棱镜和沃拉斯顿(Wollaston)棱镜等
偏振片
自然光射到人造偏振片时,使自然光变成偏振光,目前显微镜普遍采用人造偏振片。
微分干涉是利用偏光干涉原理,照明光由微分干涉对比棱镜变为两束衍射光,并使样品高度差异造成在光路上的微小差异,而光程差变为利用微分干涉对比棱镜和检偏振器的明暗对比。
微分干涉观察优点:可以使被检物体产生三维立体感;观察效果更直观;无需特殊物镜,与荧光观察配合更好;可以调节背景和物体的颜色变化而达到理想的效果。
微分干涉观察缺点:需要光强高,双折射物质不能达到DIC镜检效果,不能应用于塑料容器培养物的观察,镜检灵敏度有方向性,调节较复杂。